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塑料培養(yǎng)皿的應(yīng)用
20世紀60年代,Friedenstein等[1]發(fā)現(xiàn),在塑料培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的貼壁非造血骨髓單核細胞在一定條件下可分化為成骨細胞、成軟骨細胞、脂肪細胞和成肌細胞,而且這些細胞經(jīng)過20~30個培養(yǎng)周期,仍能保持多向分化潛能。這些細胞就是近幾年來在細胞領(lǐng)域一直倍受關(guān)注的骨髓間充質(zhì)干細胞((骨髓間充質(zhì)干細胞,MSCs)。由于MSCs具有自我更新、分化增殖和多向分化潛能的特點[2],MSCs作為一種重要的載體細胞在基因治療中越來越引起人們的關(guān)注,成為近年來國內(nèi)外研究的熱點,本文就目前MSCs在基因治療中的應(yīng)用研究進行綜述。1MSCs的分離培養(yǎng)目前用于分離MSCs的方法主要有4種:密度梯度離心法、貼壁篩選法、流式細胞儀分選法和免疫磁珠法。Hung等[3]報道Percoll分離液密度梯度離心法的MSCs獲得率很低;而免疫磁珠分選法針對MSCs特異性表面抗原,費用昂貴,操作復(fù)雜,分選難度大;流式細胞儀分選法的共聚焦激光對細胞的活性有毒害作用。目前應(yīng)用比較廣泛的是貼壁篩選法結(jié)合密度梯度離心法,效果相對較好,但是具體選擇何種方法還要依賴于實驗?zāi)康暮蜅l件。MSCs一般取自于動物的股骨、脛骨,培養(yǎng)MSCs時
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